嘔(ǒu)吐(tǔ)毒素,又稱(chēng)脫氧(yǎng)雪腐鐮(lián)刀(dāo)菌烯醇(chún),多(duō)分布於小麥(mài),大麥,玉米等穀物籽實中(zhōng), 對人體有(yǒu)一定危(wēi)害作用,歐盟(méng)分類標準為(wéi)三級(jí)致癌物(wù)。嘔吐(tǔ)毒素免疫親和(hé)柱通過嘔吐(tǔ)毒(dú)素(sù)抗(kàng)原與抗(kàng)體的特異性結(jié)合(hé),將(jiāng)毒(dú)素從(cóng)樣本(běn)中選(xuǎn)擇性(xìng)分(fēn)離(lí),從而達到(dào)淨化的效(xiào)果。那麼(mó)對於(yú)嘔吐毒(dú)素免疫(yì)親(qīn)和柱的(dí)樣品(pǐn)是如何(hé)進行(háng)處(chǔ)理的呢(ní)?下麵我(wǒ)們來(lái)詳(xiáng)細了解(jiě)下!
方(fāng)法一:酒類(lèi)
取(qǔ)脫氣的酒(jiǔ)類樣品加(jiā)入聚(jù)乙二醇(chún)8000,用(yòng)PBS緩衝液(yè)定(dìng)容;高(gāo)速(sù)均質(zhì);用(yòng)快速定(dìng)性(xìng)濾(lǜ)紙(zhǐ)過濾(lǜ),收集濾(lǜ)液;再用微纖維濾紙過濾(lǜ),並(bìng)收(shōu)集(jí)濾(lǜ)液(yè)作為(wéi)上樣液(yè);取上(shàng)樣液(yè)過免(miǎn)疫(yì)親(qīn)和柱(zhù)淨(jìng)化。
稀(xī)釋倍數(shù):2
方法二:醬(jiàng)油,醋,醬及醬製品;
取樣品,加(jiā)入聚乙二醇8000,用PBS緩衝液(yè)定(dìng)容;高(gāo)速均(jūn)質;用(yòng)快速定(dìng)性濾紙(zhǐ)過濾(lǜ),收集濾(lǜ)液(yè);再用微(wēi)纖維濾紙過濾(lǜ),並(bìng)收集(jí)濾液作為(wéi)上樣(yàng)液;取(qǔ)上(shàng)樣液過免(miǎn)疫(yì)親和柱淨化(huà)。
稀釋(shì)倍(bèi)數:2
方法三:糧(liáng)食(shí)及飼(sì)料
1.玉米(mǐ),小(xiǎo)麥,麵(miàn)粉(fěn),配(pèi)合飼(sì)料,濃(nóng)縮(suō)料,精補料(liào)等吸(xī)水性(xìng)較(jiào)小的(dí)樣(yàng)本;
稱取粉碎(suì)樣(yàng)品,聚(jù)乙二(èr)醇(chún)8000,加入(rù)蒸(zhēng)餾(liù)水;高速均質;用快速定性(xìng)濾(lǜ)紙過(guò)濾,收集濾液;再用微纖維(wéi)濾(lǜ)紙過濾,並收(shōu)集(jí)濾(lǜ)液(yè)作為上樣液;取上(shàng)樣液過(guò)免疫親(qīn)和柱淨化。
稀釋(shì)倍數:2
2.麩皮,豆皮,玉米胚(pēi)芽粕(pò),米糠等(děng)吸水性(xìng)較(jiào)強的(dí)樣本;
稱取樣品,聚(jù)乙(yǐ)二(èr)醇8000,加(jiā)入蒸餾(liù)水(shuǐ);高速均質;用(yòng)快(kuài)速定性濾(lǜ)紙過濾,收集濾液(yè);再用微(wēi)纖維濾(lǜ)紙過濾,並收集濾(lǜ)液作(zuò)為上(shàng)樣(yàng)液;取(qǔ)上樣(yàng)液過免(miǎn)疫(yì)親和(hé)柱淨(jìng)化。
稀(xī)釋倍(bèi)數(shù):2
注意事項:
1.使(shǐ)用前(qián),免疫(yì)親(qīn)和(hé)柱(zhù)需(xū)回(huí)至(zhì)室(shì)溫(wēn)(22~25℃)。
2.親和(hé)柱2~8℃儲存,不得(dé)凍(dòng)存。
3.不要使用(yòng)過(guò)了有效(xiào)日(rì)期的免(miǎn)疫親(qīn)和柱(zhù)。
4.取樣量:根據(jù)需要(yào)可(kě)以(yǐ)適(shì)當增加(jiā)或減(jiǎn)少取樣量,注意提(tí)取液(yè)量要(yào)相(xiāng)應(yīng)改(gǎi)變(biàn)。
5.pH:親和柱的(dí)上(shàng)樣(yàng)溶液pH需(xū)在6~8之間,若(ruò)偏(piān)離此範圍(wéi)需要用鹽(yán)酸或(huò)*調節pH。
6.由於(yú)樣(yàng)本中(zhōng)嘔(ǒu)吐(tǔ)毒(dú)素的(dí)含(hán)量普(pǔ)遍(biàn)較(jiào)高,如果計(jì)算後樣本(běn)含量大於4mg/kg時,表(biǎo)示已經(jīng)超(chāo)過親和(hé)柱(zhù)柱容量,需要適(shì)當降(jiàng)低上樣液的體(tǐ)積(jī),重新檢(jiǎn)測。
7.上機檢測時的溶劑(jì)與(yǔ)流動(dòng)相(xiāng)保(bǎo)持(chí)一(yī)致可(kě)以消除溶(róng)劑效應的影響。
8.嘔吐(tǔ)毒素可(kě)致(zhì)癌(ái),應戴(dài)手(shǒu)套(tào)操作。
9.使用過的容(róng)器及(jí)標(biāo)準(zhǔn)品(pǐn)溶(róng)液(yè)最好用次(cì)氯酸鈉(nà)溶(róng)液(yè)(5%V/V)浸(jìn)泡(pào)過夜。
